ウルソデオキシコール酸の HPLC-CAD 分析レポート

ウルソデオキシコール酸（UDCA）は、化学名 3α,7β-ジヒドロキシ-5β-コラン-24-酸の有機化合物で、無臭で苦味があります。医療では胆汁酸分泌を増加させ、胆汁組成を変化させ、胆汁中のコレステロールおよびコレステリルエステルを低下させ、胆石中コレステロールの段階的な溶解を助ける目的で使用されます。

CAS登録番号：128-13-2。EINECS番号：204-879-3。分子量：392.572。

2020 年版の中国薬典では、ウルソデオキシコール酸の類縁物質は薄層クロマトグラフィーで確認され、含量は滴定法で測定されます。本アプリケーションでは、実用性、再現性、不純物検出能力および品質管理支援を高めるため、荷電エアロゾル検出法を検討しました。

荷電エアロゾル検出器（CAD）は、不揮発性および半揮発性分析対象に適した、ほぼ汎用的な質量感応型検出器です。CAD の応答は分子構造に左右されにくく、分析対象をイオン化する必要もありません。同等条件では、絶対質量が同じ試料は概ね同等の応答を示し、低い検出限界と高感度の実現を支援します。

1. 装置と材料

装置：Agilent 1200 液体クロマトグラフ + Instrumax CADetector a1 荷電エアロゾル検出器。

試薬：酢酸アンモニウム、純水（Watsons distilled water）、メタノール（クロマトグラフィーグレード）、ギ酸（分析用）。

試料：顧客から提供された UDA21 および UDP2451。UDP2451 は粗生成物。

2. 方法と結果

2.1 クロマトグラフィー条件

カラム：ODS Hypersil 125 × 4 mm、3 μm。カラム温度：40 °C。流量：0.8 mL/min。

注入量：10 μL。

移動相 A：5 mmol/L 酢酸アンモニウム + 0.1% ギ酸水溶液。移動相 B：メタノール。

グラジエント条件：

A/B 比率：40/60、10/90、10/90、40/60、40/60。

CAD 条件：Instrumax CADetector a1、ドリフトチューブ温度 40 °C、ネブライザーガス流量 3 L/min、コロナ／帯電電流 1 μA、帯電ガス流量 1 L/min。

2.2 試料調製

希釈液：メタノール／移動相 A（70:30）。

試料約 20 mg を 10 mL メスフラスコに量り取り、メタノールで溶解後、70% 希釈液で定容し、約 2 mg/mL とします。

UDA21 は 1% 対照試料として 20 μg/mL に調製します。

2.3 実験結果

注：各試料にはクロマトグラムの拡大図を付けています。

上記 HPLC-CAD 条件で、UDA21 および UDP2451 試料の CAD 応答を評価しました。クロマトグラムでは、ウルソデオキシコール酸および関連不純物シグナルを明瞭に確認できます。

UDP2451 および粗生成物試料のクロマトグラム詳細は、メソッド評価と不純物モニタリングを支援します。

重ね合わせおよび拡大クロマトグラムは、応答挙動と不純物検出能力をさらに示しています。

クロマトグラフィーデータは、CAD 検出におけるウルソデオキシコール酸および関連不純物ピークの実用的な応答を示しています。

3. 結論

CAD はウルソデオキシコール酸に対して良好な応答を示し、不純物も有効に検出できました。

CAD 検出器は、ウルソデオキシコール酸のプロセス最適化および品質管理に必要なデータ支援を提供できます。本 HPLC-CAD 法は操作が簡便で、特異性と感度が高く、ウルソデオキシコール酸の品質管理と評価に使用できます。