우르소데옥시콜산 HPLC-CAD 분석 보고서

우르소데옥시콜산(UDCA)은 화학명 3α,7β-dihydroxy-5β-cholestan-24-oic acid인 무취의 쓴맛을 가진 유기화합물입니다. 의학적으로는 담즙산 분비를 증가시키고 담즙 조성을 변화시키며, 담즙 내 콜레스테롤 및 콜레스테릴 에스터를 낮추고 담석 속 콜레스테롤의 점진적 용해를 돕는 데 사용됩니다.

CAS 등록번호: 128-13-2; EINECS/EC 번호: 204-879-3; 분자량: 392.572.

2020년판 중국약전에서는 우르소데옥시콜산의 관련 물질을 박층 크로마토그래피로 확인하고, 함량은 적정법으로 측정합니다. 본 응용은 실용성, 반복성, 불순물 검출 능력 및 품질 관리 지원을 향상하기 위해 전하 에어로졸 검출 방법을 개발했습니다.

전하 에어로졸 검출기(CAD)는 비휘발성 및 반휘발성 분석물에 적합한 준범용 질량 감응형 검출기입니다. CAD 응답은 분자 구조에 크게 좌우되지 않으며 분석물이 이온화될 필요도 없습니다. 동일한 조건에서 절대 분석물 질량이 같은 시료는 대체로 유사한 응답을 보여 낮은 검출한계와 높은 감도 구현을 지원합니다.

1. 기기 및 재료

기기: Agilent 1200 액체 크로마토그래프 + Instrumax CADetector a1 전하 에어로졸 검출기.

시약: 아세트산암모늄, 정제수(Watsons distilled water), 메탄올(크로마토그래피 등급), 포름산(분석 등급).

시료: 고객이 제공한 UDA21 및 UDP2451. UDP2451은 조시료입니다.

2. 방법 및 결과

2.1 크로마토그래피 조건

컬럼: ODS Hypersil 125 × 4 mm, 3 μm. 컬럼 온도: 40 °C. 유속: 0.8 mL/min.

주입량: 10 μL.

이동상 A: 5 mmol/L 아세트산암모늄 + 0.1% 포름산 수용액. 이동상 B: 메탄올.

그라디언트 조건:

A/B 비율: 40/60, 10/90, 10/90, 40/60, 40/60.

CAD 조건: Instrumax CADetector a1; 드리프트 튜브 온도 40 °C; 분무 가스 유량 3 L/min; 코로나/대전 전류 1 μA; 대전 가스 유량 1 L/min.

2.2 시료 조제

희석액: 메탄올/이동상 A(70:30).

시료 약 20 mg을 10 mL 메스플라스크에 넣고 메탄올로 녹인 뒤 70% 희석액으로 정용하여 약 2 mg/mL로 조제합니다.

UDA21은 1% 대조 시료로 20 μg/mL 농도로 조제합니다.

2.3 실험 결과

비고: 각 시료에는 크로마토그램의 부분 확대도가 포함되어 있습니다.

위 HPLC-CAD 조건에서 UDA21 및 UDP2451 시료의 CAD 응답을 평가했습니다. 크로마토그램에서 우르소데옥시콜산 및 관련 불순물 신호를 명확히 관찰할 수 있습니다.

UDP2451 및 조시료의 크로마토그램 세부 정보는 방법 평가와 불순물 모니터링을 지원합니다.

중첩 및 확대 크로마토그램은 응답 거동과 불순물 검출 능력을 추가로 보여줍니다.

크로마토그래피 데이터는 CAD 검출 조건에서 우르소데옥시콜산과 관련 불순물 피크에 대한 실용적인 응답을 보여줍니다.

3. 결론

CAD는 우르소데옥시콜산에 대해 양호한 응답을 보였으며, 불순물도 효과적으로 검출되었습니다.

CAD 검출기는 우르소데옥시콜산의 공정 최적화와 품질 관리를 위한 데이터 지원을 제공할 수 있습니다. 본 HPLC-CAD 방법은 조작이 간단하고 특이성과 감도가 높아 우르소데옥시콜산의 품질 관리와 평가에 사용할 수 있습니다.