INSTRUMAX CAD-トブラマイシン アッセイ決定 - アプリケーションノート

1、序文

荷電化粒子検出器（CAD）(帯電エアロゾル検出器、CAD）は近年開発された新しい汎用検出器です。その検出は測定対象物質の分子構造とは無関係であり、測定対象物質をイオン化する必要もありません。測定対象物質が半揮発性または不揮発性の化合物であれば使用可能です。CAD 検出。同時に、CAD 質量に敏感な検出器です。測定対象物質の応答値は、測定対象物質の品質によって決まります。 試料 試されている。の品質がある限り、 試料 検査対象が一貫していれば、測定される応答値は基本的に同じになり、より低い検出限界とより高い感度が得られます。

荷電化粒子検出器（CAD） はい INSTRUMAX 研究開発チームは、長年にわたる熱心な研究と実験の繰り返しを経て、大きな科学技術的成果を達成しました。検出器は高度な電気技術と霧化技術を採用し、高感度・高精度な微量検出を実現 試料s.

トブラマイシン(トブラマイシン)、としても知られています トブラマイシン、アミノグリコシド系抗生物質です。アミノグリコシド系抗生物質は共役構造を含まないため、弱い性質を持っています。 UV 吸収が少ないため、従来の分析には適していません。 UV 検出器を直接使用します。2020 「中国薬局方」の版トブラマイシン 原材料に関連する物質は蒸発光散乱検出器を使用して検出されます（ELSD）、ELSD と CAD 他の方法に比べて感度が低く、再現性も悪いため、含有量検出項目は微生物検定法を使用しており、特異性が低い。 《USP》現在の規格では トブラマイシン 関連物質の検出には薄層クロマトグラフィーが使用されますが、各不純物を詳細に分析することはできません。コンテンツ検出方法は、 試料 を通して UV 誘導体化後に検出器を使用する必要があり、操作が比較的煩雑です。このため、米国薬局方委員会は、 2023 年 1 毎月リリースされるコメントの草案^[1]、採用する HPLC-CAD メソッドのテスト トブラマイシン 関連物質および内容物。

この記事では、諮問草案方式を参考にしており、 INSTRUMAX CAD アジレントとの組み合わせ SB-C18 バーペア トブラマイシン 含有量の決定方法を検討した。この方法は、強い特異性、高感度、良好な再現性、良好な直線性を備えており、次の要件を満たすことができます。 トブラマイシン 原材料および関連する調製物の品質管理要件。

2、 装置 と材料

装置:Agilent1200 液体クロマトグラフ+荷電化粒子検出器（CAD）(INSTRUMAX、モデル: CADetector a1)

試薬：純水（ワトソン蒸留水）、アセトニトリル（クロマトグラフィーグレード）、トリフルオロ酢酸（分析グレード）

試料:トブラマイシン 試料s (ユーザーの先生のご厚意で提供していただきました)

3、方法と結果

2.1 クロマトグラフィー条件

カラム: アジレント ZORBAX SB C18、4.6mm x250mm、3.5μm

カラム温度:10℃ 流量:0.8mL/min

注入量:25μL

移動相 答え:0.3%TFA 水溶液 移動相 B:0.3%TFA アセトニトリル溶液

グラジエント溶出

CAD 条件:

装置 モデル:INSTRUMAX CADetector a1

ドリフトチューブ温度:40℃ 霧化された空気の流れ:3L/min

コロナの流れ：1μA コロナ気流：1L/min

ゲイン:0.2

2.2 試料 準備

(1) ブランク溶媒: 移動相 あ

(2)Control 解決策-つまり、 試料 原料から調製した溶液

基準物質原液：採取 トブラマイシン 基準物質約 18mg(0.018g)、正確に計量し、設定します 100m1 メスフラスコに、 希釈液 (移動相 A) 約10ml 溶解して一定量に希釈し、よく振ってください。濃度は 180.0μg/mL

線形解法 1: 含有標準物質原液を精密測定 3ml、セット 50m1 計量瓶に入れて標線まで希釈します。 希釈液 そしてよく振ってください。濃度は 10.8μg/mL

線形解法 2: 含有標準物質原液を精密測定 2ml、セット 25m1 計量瓶に入れて標線まで希釈します。 希釈液 そしてよく振ってください。濃度は 14.4μg/mL

線形解法 3: 含有標準物質原液を精密測定 1m1、セット 10m1 計量瓶に入れて標線まで希釈します。 希釈液 そしてよく振ってください。濃度は 18.0μg/mL

線形解法 4: 含有標準物質原液を精密測定 3ml、セット 25m1 計量瓶に入れて標線まで希釈します。 希釈液 そしてよく振ってください。濃度は 21.6μg/mL

線形解法 5: 含有標準物質原液を精密測定 3ml、セット 20m1 計量瓶に入れて標線まで希釈します。 希釈液 そしてよく振ってください。濃度は 27.0μg/mL

2.3 実験結果

2.3.1 独占性

ブランクはメインピークの決定を妨げず、優れた特異性を備えています。

図 1 ブランク グラジエント (注入なし)

図 2 ブランク溶媒 (移動相 A)

図 3 トブラマイシン コントロール原液 180μg/mL 図

2.3.1 線形解法 1-Number 理論ボードの

線形解法 1(The 集中力は 10.8μg/mL)、理論段数を計算します (USP)、理論上のボードの数は 16600.5(＞3000)、 カラム パフォーマンスは良いです。

図 4 トブラマイシン 基準線形解 1(10.8μg/mL) 図

2.3.2 標準物質注入精度

濃度は 18.0μg/mL 標準溶液の連続注入 5 ニードル、ピークエリア RSD%は 0.980%(<2.0%）、精度は良好です。

2.3.3 基準溶液の直線性

線形解法 1 線形解へ 5、注入する 試料別々に 1 針、線形溶液濃度とピーク面積を使用して線形回帰式を作成します。

結果は、線形相関係数 R が 0.99918(＞0.995)、直線性は良好です。

1. 実験的な議論:
2. から見ることができます 実験結果 空白のグラデーションは 15～16min 勾配のピークがありますが、実験には影響しません。ブランクの溶媒が入っています 2～5min はい 4 ピークに関係しているので、 トブラマイシン メインピークの保持時間は大きく離れており、検出に干渉しないため、この実験ではそれ以上の調査や調査は行われませんでした。
3. この実験では、特異性、原料注入精度、直線性、準備などのいくつかの側面を検査しました。 試料s、およびプレパレーション注入精度。INSTRUMAX CAD の適合性については、 試料、結果は次のことを示しています INSTRUMAX CAD の 試料 検出、再現性、直線性などの結果が良好で、実験のニーズを満たすことができます。

参考文献[1] USP-NF コメントの下書き トブラマイシン [S]。