INSTRUMAX CAD-Tobramycin Assay-Bestimmung – Anwendungshinweis

1, Vorwort

Charged-Aerosol-Detektor (CAD)(Detektor für geladene Aerosole,CAD) ist ein neuer Allzweckdetektor, der in den letzten Jahren entwickelt wurde. Sein Nachweis hat nichts mit der molekularen Struktur der zu messenden Substanz zu tun, und die zu messende Substanz muss nicht ionisiert werden. Es kann verwendet werden, solange es sich bei der zu messenden Substanz um eine halbflüchtige oder nichtflüchtige Verbindung handelt.CAD Erkennung. Gleichzeitig,CAD Es handelt sich um einen massenempfindlichen Detektor. Der Ansprechwert der gemessenen Substanz wird durch die Qualität der gemessenen Substanz bestimmt Probe getestet wird. Solange die Qualität der Probe Wenn der getestete Wert konsistent ist, ist der gemessene Ansprechwert im Wesentlichen derselbe und es können eine niedrigere Nachweisgrenze und eine höhere Empfindlichkeit erzielt werden.

Charged-Aerosol-Detektor (CAD) Ja INSTRUMAX Das Forschungs- und Entwicklungsteam hat nach Jahren sorgfältiger Forschung und wiederholter Experimente große wissenschaftliche und technologische Errungenschaften erzielt. Der Detektor nutzt fortschrittliche Elektrizitäts- und Zerstäubungstechnologie, um eine hochempfindliche und hochpräzise Spurenerkennung zu erreichen Probe s.

Tobramycin(Tobramycin), auch bekannt als Tobramycin ist ein Aminoglykosid-Antibiotikum. Aminoglykosid-Antibiotika enthalten keine konjugierten Strukturen und sind schwach UV Absorption, wodurch sie für die herkömmliche Analyse ungeeignet sind UV Melder direkt.2020 Ausgabe des „Chinesischen Arzneibuchs“Tobramycin Materialien im Zusammenhang mit Rohstoffen werden mithilfe von Verdunstungslichtstreuungsdetektoren erfasst (ELSD),ELSD mit CAD Im Vergleich zu anderen Methoden ist die Empfindlichkeit gering und die Wiederholbarkeit schlecht; Das Inhaltserkennungselement verwendet eine mikrobielle Testmethode und die Spezifität der Methode ist schlecht. 《USP》In aktuellen Standards Tobramycin Der Nachweis relevanter Substanzen erfolgt mittels Dünnschichtchromatographie, die keine detaillierte Analyse jeder einzelnen Verunreinigung durchführen kann; Die Inhaltserkennungsmethode besteht darin, die zu erkennen Probe durch a UV Detektor nach der Derivatisierung, und die Bedienung ist relativ umständlich. Aus diesem Grund hat die United States Pharmacopeia Commission 2023 Jahr 1 Entwurf für monatlich veröffentlichte Kommentare^[1], adoptieren HPLC-CAD Methodentest Tobramycin verwandte Substanzen und Inhalte.

Dieser Artikel bezieht sich auf die Konsultationsentwurfsmethode und übernimmt diese INSTRUMAX CAD Kombiniert mit Agilent SB-C18 Balkenpaar Tobramycin Die Methode zur Inhaltsbestimmung wurde untersucht. Diese Methode weist eine starke Spezifität, hohe Empfindlichkeit, gute Wiederholbarkeit und gute Linearität auf und kann die Anforderungen von erfüllen Tobramycin Qualitätskontrollanforderungen für Rohstoffe und zugehörige Zubereitungen.

2, Instrumente und Materialien

Instrumente:Agilent1200 Flüssigchromatograph+Charged-Aerosol-Detektor (CAD)(INSTRUMAX, Modell: CADetector a1)

Reagenzien: reines Wasser (Watson's destilliertes Wasser), Acetonitril (Chromatographiequalität), Trifluoressigsäure (Analysequalität)

Probe:Tobramycin Probe s (freundlicherweise zur Verfügung gestellt von den Benutzerlehrern)

3, Methoden und Ergebnisse

2.1 Chromatographische Bedingungen

Säule: Agilent ZORBAX SB C18,4.6mm x250mm，3.5μm

Säulentemperatur:10℃ Flussrate:0.8mL/min

Injektionsvolumen:25μL

Mobile Phase A:0.3%TFA Wässrige Lösung Mobile Phase B:0.3%TFA Acetonitrillösung

Gradientenelution

CAD Bedingungen:

Instrument Modell:INSTRUMAX CADetector a1

Driftrohrtemperatur:40℃ Zerstäubter Luftstrom:3L/min

Corona aktuell:1μA Corona-Luftstrom:1L/min

Gewinn:0.2

2.2 Probe Vorbereitung

(1) Leerlösungsmittel: Mobile Phase A

(2)Control Lösung-Das heißt, die Probe aus Rohstoffen hergestellte Lösung

Referenzsubstanz-Stammlösung: nehmen Tobramycin Referenzsubstanz ca. 18mg(0.018g), genau abgewogen, eingestellt 100m1 In den Messkolben geben Verdünnungsmittel (Mobile Phase A) für ca.10ml Auflösen und auf Volumen verdünnen, gut schütteln.Die Konzentration ist 180.0μg/mL

lineare Lösung 1: Messen Sie den Inhalt der Referenzsubstanz-Stammlösung genau ab 3ml, eingestellt 50m1 In einer Messflasche bis zur Marke verdünnen Verdünnungsmittel und gut schütteln.Die Konzentration ist 10.8μg/mL

lineare Lösung 2: Messen Sie den Inhalt der Referenzsubstanz-Stammlösung genau ab 2ml, eingestellt 25m1 In einer Messflasche bis zur Marke verdünnen Verdünnungsmittel und gut schütteln.Die Konzentration ist 14.4μg/mL

lineare Lösung 3: Messen Sie den Inhalt der Referenzsubstanz-Stammlösung genau ab 1m1, eingestellt 10m1 In einer Messflasche bis zur Marke verdünnen Verdünnungsmittel und gut schütteln.Die Konzentration ist 18.0μg/mL

lineare Lösung 4: Messen Sie den Inhalt der Referenzsubstanz-Stammlösung genau ab 3ml, eingestellt 25m1 In einer Messflasche bis zur Marke verdünnen Verdünnungsmittel und gut schütteln.Die Konzentration ist 21.6μg/mL

lineare Lösung 5: Messen Sie den Inhalt der Referenzsubstanz-Stammlösung genau ab 3ml, eingestellt 20m1 In einer Messflasche bis zur Marke verdünnen Verdünnungsmittel und gut schütteln.Die Konzentration ist 27.0μg/mL

2.3 Versuchsergebnisse

2.3.1 Exklusivität

Der Blindwert stört die Bestimmung des Hauptpeaks nicht und weist eine gute Spezifität auf.

Abbildung 1 Leergradient (keine Injektion)

Abbildung 2 Leerlösungsmittel (Mobile Phase A)

Abbildung 3 Tobramycin Kontrollstammlösung 180μg/mL Abbildung

2.3.1 lineare Lösung 1-Number von theoretischen Tafeln

lineare Lösung 1(The Konzentration ist 10.8μg/mL), berechnen Sie die Anzahl der theoretischen Böden (USP), die Anzahl der theoretischen Tafeln beträgt 16600.5(＞3000), die Säule Leistung ist gut.

Abbildung 4 Tobramycin Referenzlinearlösung 1(10.8μg/mL) Diagramm

2.3.2 Präzision der Referenzsubstanz-Injektion

Die Konzentration ist 18.0μg/mL Referenzlösung, kontinuierliche Injektion 5 Nadel, Spitzenbereich RSD% ist 0.980%(<2.0%), mit guter Präzision.

2.3.3 Linearität der Referenzlösung

lineare Lösung 1 zur linearen Lösung 5, spritzen Probe s separat 1 Nadel, verwenden Sie die lineare Lösungskonzentration und die Peakfläche, um eine lineare Regressionsgleichung zu erstellen.

Die Ergebnisse zeigen, dass der lineare Korrelationskoeffizient R ist 0.99918(＞0.995), die Linearität ist gut.

1. Experimentelle Diskussion:
2. Es ist aus dem zu sehen Versuchsergebnisse dass der leere Farbverlauf ist 15~16min Es gibt Gradientenspitzen, die keinen Einfluss auf das Experiment haben; das Leerlösungsmittel ist drin 2~5min Ja 4 Höhepunkt, weil es damit zusammenhängt Tobramycin Die Retentionszeiten der Hauptpeaks liegen weit auseinander und beeinträchtigen den Nachweis nicht, sodass in diesem Experiment keine weiteren Untersuchungen und Untersuchungen durchgeführt wurden.
3. Dieses Experiment untersuchte verschiedene Aspekte wie Spezifität, Präzision der Rohstoffinjektion, Linearität und Vorbereitung Probe s und Vorbereitungsinjektionspräzision.INSTRUMAX CAD Für die Eignung der Probe, das zeigen die Ergebnisse INSTRUMAX CAD Die Probe Erkennung, Wiederholbarkeit, Linearität und andere Ergebnisse sind gut und können die experimentellen Anforderungen erfüllen.

Referenzen[1] USP-NF Entwurf für Kommentare Tobramycin [S].