INSTRUMAX CAD-토브라마이신 분석 결정 - 애플리케이션 노트

1, 서문

하전 에어로졸 검출기(CAD)(하전 에어로졸 검출기,CAD)는 최근 개발된 새로운 범용 검출기입니다. 검출은 측정 대상 물질의 분자 구조와 관련이 없으며 측정 대상 물질을 이온화할 필요가 없습니다. 측정 물질이 반휘발성 또는 비휘발성 화합물이면 사용할 수 있습니다.CAD 발각. 동시에,CAD 질량에 민감한 검출기입니다. 측정되는 물질의 반응값은 물질의 품질에 따라 결정됩니다. 시료 테스트 중입니다. 품질이 좋은 만큼 시료 테스트 대상이 일관적이면 측정된 응답 값은 기본적으로 동일하며 더 낮은 검출 한계와 더 높은 감도를 얻을 수 있습니다.

하전 에어로졸 검출기(CAD) 예 INSTRUMAX R&D 팀은 수년간의 고된 연구와 반복적인 실험을 통해 중요한 과학 기술 성과를 달성했습니다. 감지기는 첨단 전기 및 원자화 기술을 사용하여 흔적의 고감도 및 고정밀 감지를 달성합니다. 시료s.

토브라마이신(토브라마이신)라고도 함 토브라마이신, 아미노글리코사이드 항생제입니다. 아미노글리코사이드계 항생제는 접합구조를 갖지 않으며 약하다. UV 흡수하므로 기존의 분석에는 부적합합니다. UV 직접 감지기.2020 "중국약전" 개정판토브라마이신 증발광산란검출기를 이용하여 원자재와 관련된 물질을 검출합니다.ELSD),ELSD 와 CAD 다른 방법에 비해 감도가 낮고 반복성이 좋지 않습니다. 함량검출 항목은 미생물 정량법을 사용하고 있어 방법의 특이성이 좋지 않다. 《USP》현재 기준으로 토브라마이신 관련 물질의 검출은 박층 크로마토그래피를 사용하므로 각 불순물에 대한 심층적인 분석을 수행할 수 없습니다. 콘텐츠 감지 방법은 시료 통해 UV 유도체화 후 검출기가 필요하며 작업이 상대적으로 번거롭습니다. 이러한 이유로 미국 약전 위원회(United States Pharmacopeia Commission)는 2023 년 1 매월 발표되는 의견 초안^[1], 채택하다 HPLC-CAD 방법 테스트 토브라마이신 관련 물질 및 함량.

본 조는 협의안 작성방법을 언급하고 이를 채택한다. INSTRUMAX CAD 애질런트와 결합 SB-C18 바 쌍 토브라마이신 함량결정방법을 조사하였다. 이 방법은 강한 특이성, 높은 감도, 우수한 반복성, 우수한 선형성을 가지며 다음 요구 사항을 충족할 수 있습니다. 토브라마이신 원료 및 관련 준비에 대한 품질 관리 요구 사항.

2, 기기 및 재료

기기:Agilent1200 액체 크로마토그래프+하전 에어로졸 검출기(CAD)(INSTRUMAX, 모델: CADetector a1)

시약: 순수(왓슨 증류수), 아세토니트릴(크로마토그래피 등급), 트리플루오로아세트산(분석 등급)

시료:토브라마이신 시료s (사용자 교사가 친절하게 제공)

3, 방법 및 결과

2.1 크로마토그래피 조건

컬럼: 애질런트 ZORBAX SB C18,4.6mm x250mm,3.5μm

컬럼 온도:10℃ 유속:0.8mL/min

주입량:25μL

이동상 답:0.3%TFA 수용액 이동상 비:0.3%TFA 아세토니트릴 용액

기울기 용출

CAD 조건:

기기 모델:INSTRUMAX CADetector a1

드리프트 튜브 온도:40℃ 원자화된 공기 흐름:3L/min

코로나 전류:1μA 코로나 기류:1L/min

이득:0.2

2.2 시료 준비

(1) 빈 용매: 이동상 에이

(2)Control 해결책-즉, 시료 원료로 준비된 용액

기준물질 원액: 취한다 토브라마이신 기준 물질 약. 18mg(0.018g), 정확하게 무게를 달고 설정 100m1 측정 플라스크에 다음을 추가하십시오. 희석액 (이동상 A) 대략.10ml 용해 및 부피에 맞게 희석하고 잘 흔들어줍니다.농도는 180.0μg/mL

선형 솔루션 1: 함량 기준 물질 원액을 정확하게 측정합니다. 3ml, 설정 50m1 계량병에 표선까지 희석하여 희석액 그리고 잘 흔들어주세요.농도는 10.8μg/mL

선형 솔루션 2: 함량 기준 물질 원액을 정확하게 측정합니다. 2ml, 설정 25m1 계량병에 표선까지 희석하여 희석액 그리고 잘 흔들어주세요.농도는 14.4μg/mL

선형 솔루션 3: 함량 기준 물질 원액을 정확하게 측정합니다. 1m1, 설정 10m1 계량병에 표선까지 희석하여 희석액 그리고 잘 흔들어주세요.농도는 18.0μg/mL

선형 솔루션 4: 함량 기준 물질 원액을 정확하게 측정합니다. 3ml, 설정 25m1 계량병에 표선까지 희석하여 희석액 그리고 잘 흔들어주세요.농도는 21.6μg/mL

선형 솔루션 5: 함량 기준 물질 원액을 정확하게 측정합니다. 3ml, 설정 20m1 계량병에 표선까지 희석하여 희석액 그리고 잘 흔들어주세요.농도는 27.0μg/mL

2.3 실험 결과

2.3.1 독점성

공백은 주피크 결정을 방해하지 않으며 특이도가 좋습니다.

그림 1 블랭크 그라데이션(주입 없음)

그림 2 빈 용매(이동상 가)

그림 3 토브라마이신 컨트롤 스톡 솔루션 180μg/mL 그림

2.3.1 선형 솔루션 1-Number 이론 보드

선형 솔루션 1(The 농도는 10.8μg/mL), 이론단수를 계산합니다(USP), 이론 보드 수는 16600.5(＞3000), 컬럼 성능이 좋다.

그림 4 토브라마이신 참조 선형 솔루션 1(10.8μg/mL) 다이어그램

2.3.2 기준물질 주입 정밀도

농도는 18.0μg/mL 표준 용액, 연속 주입 5 바늘, 피크 영역 RSD%는 0.980%(<2.0%), 정밀도가 좋습니다.

2.3.3 참조 솔루션 선형성

선형 솔루션 1 선형 솔루션으로 5, 주사하다 시료별도로 1 바늘, 선형 용액 농도와 피크 면적을 사용하여 선형 회귀 방정식을 만듭니다.

결과는 선형 상관 계수 R이 다음과 같다는 것을 보여줍니다. 0.99918(＞0.995), 선형성이 좋습니다.

1. 실험적 논의:
2. 그것은에서 볼 수 있습니다 실험 결과 빈 그라데이션은 15~16min 실험에 영향을 주지 않는 기울기 피크가 있습니다. 빈 용매가 들어있습니다. 2~5min 예 4 피크와 관련이 있기 때문입니다. 토브라마이신 주요 피크의 머무름 시간은 멀리 떨어져 있고 검출을 방해하지 않으므로 본 실험에서는 추가 조사 및 조사가 수행되지 않았습니다.
3. 이번 실험에서는 특이성, 원료 주입 정밀도, 선형성, 준비 등 여러 측면을 검토했습니다. 시료s 및 준비 주입 정밀도.INSTRUMAX CAD 적합성을 위해 시료, 결과는 INSTRUMAX CAD 는 시료 검출, 반복성, 선형성 및 기타 결과가 양호하며 실험 요구를 충족할 수 있습니다.

참고문헌[1] USP-NF 의견 초안 토브라마이신 [에스].