하전 에어로졸 검출기(CAD) 애플리케이션 개요--
유도체화 없이 직접 측정 17 아미노산
Instrumax (Tianjin) Co., Ltd.하전 에어로졸 검출기(CAD) 애플리케이션 개요--
Instrumax (Tianjin) Co., Ltd.1, 서문
아미노산 분석은 생명과학 연구에서 가장 중요한 기술 중 하나입니다. 아미노산은 인간 단백질의 기본 구성 요소입니다. 몇몇 방향족 아미노산을 제외하고는 UV 흡수력이 약해요. 직접 사용 UV 검출기는 검출 감도가 낮고 간섭이 높습니다. 최근 펩타이드 의약품 연구에서는 아미노산 조성 분석(Amino Acid Composition Analysis, AACA)은 필수적인 핵심 링크입니다. 아미노산 서열 검증과 같은: 펩타이드 약물의 생물학적 활성은 아미노산 서열과 구성에 크게 의존합니다. 아미노산 조성을 분석함으로써 합성된 펩타이드가 표적 서열과 일치하는지 확인하고 합성 오류(예: 아미노산 결실, 치환 또는 예상치 못한 변형)로 인한 기능적 실패를 방지할 수 있습니다. 아미노산 구조 특성 분석: 질량 분석법과 결합(MS) 및 크로마토그래피 기술(예: HPLC-CAD), 아미노산 조성 분석은 복잡한 폴리펩티드(예: 비천연 아미노산 또는 번역 후 변형을 포함하는 폴리펩티드)의 분자 구조를 분석하여 설계 요구 사항을 충족하는지 확인하는 데 도움이 될 수 있습니다.
이용하다 하전 에어로졸 검출기(CAD) 결합하다 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)(HPLC) 유도체화 없이 직접 검출용 17 상당한 기술적 이점을 보여주는 아미노산. 기존 방법에 비해 이 기술은 번거로운 유도체화 단계가 필요 없으며 유도체화의 불안정성으로 인한 감도 변동 및 정량적 편차를 방지합니다. 시약, 부반응 또는 제품 다양성.CAD 검출기의 보편적 원리로 인해 비휘발성 및 약한 신호에도 고감도로 반응할 수 있습니다. UV-흡수 화합물(예: 아미노산)로 특정 작용기 변형에 의존하지 않고 정확한 검출이 가능합니다. 이 방법은 전처리 과정을 단순화하고, 분석 시간을 단축하며, 독성 물질의 사용을 줄입니다. 시약, 이는 녹색 화학의 개념과 일치합니다. 또한 넓은 동적 범위와 우수한 선형 관계는 복잡한 매트릭스(예: 생물학적 체액 및 식품)에 있는 여러 아미노산의 동시 정량 분석을 지원합니다. 시료s) 처리량이 많은 실험실에서 신속한 스크리닝 및 품질 관리에 특히 적합합니다. 연구에 따르면 이 분석법은 머무름 시간 안정성, 반복성 및 회복성 측면에서 우수한 성능을 발휘하여 생명 과학, 임상 진단 및 식품 산업에 효율적이고 신뢰할 수 있는 분석 솔루션을 제공하는 것으로 확인되었습니다.
이 기사에서는 역상을 사용합니다. HPLC 결합하다 INSTRUMAX 의 하전 에어로졸 검출기(CAD) 직접 측정 17 이 방법은 빠르고 간단하며 정확하고 민감도가 높으며 재현성이 있고 선형적이므로 아미노산 검출 및 펩타이드 약물 연구에 대한 강력한 기술 지원을 제공합니다.
Instrumax (Tianjin) Co., Ltd.2, 기기 및 재료
기기:Agilent1200 액체 크로마토그래프
CAD 검출기(INSTRUMAX, 모델: CADetector a1)
시약: 순수(왓슨 증류수),
아세토니트릴(크로마토그래피적으로 순수),
트리플루오로아세트산(분석 등급)
헵타플루오로부티르산(분석 등급)
시료: 염산 용액에 17 아미노산 혼합용액 표준물질 (Weiye 측정 표준물질)
3, 방법 및 결과
3.1 크로마토그래피 조건
컬럼:ZORBAX SB-C18 3.5μm 4.6*250mm
유속:0.8mL/min
이동상 A: 물 (0.7%트리플루오로아세트산+5mm ol/L 헵타플루오로부티르산) 이동상 B: 아세토니트릴
기울기 용리
희석제: 물
CAD 조건:
기기 모델:INSTRUMAX CADetector a1
드리프트 튜브 온도:35℃
원자화된 공기 흐름:3L/min
코로나 기류:1L/min
코로나 전류:1μA
이득:0.05
RF：2.0
Instrumax (Tianjin) Co., Ltd.3.2 실험 결과
3.2.1 17 아미노산 분리: 이 방법에 따라 17 아미노산은 잘 분리되며 인접한 성분도 효과적으로 분리됩니다. 각 아미노산의 피크 모양은 날카롭고 컬럼 효율성이 높습니다.
Instrumax (Tianjin) Co., Ltd.3.2.2 100pmol 는 시료 신호 대 잡음비가 좋습니다(소프트웨어 P2P 방법이 자동으로 계산됨)
Instrumax (Tianjin) Co., Ltd.3.2.3 사출정밀도,1mm ol/L 표준 시료- 주사 5μL, 연속 주입 6 바늘, 각 아미노산 RSD%가 더 좋습니다.
3.2.4 선형
Instrumax (Tianjin) Co., Ltd.주사하다 1μL,2μL,5μL,10μL 그리고 20μL, 주입량과 피크 면적을 사용하여 선형 방정식을 만듭니다.
선형성이 좋고 각 성분의 상관계수 R이 0.999.
요약표는 다음과 같습니다.
일련번호 | 성분 | 선형 방정식 | 상관계수 R |
1 | 글리신(Cly) | y=18.4029x-2.4676 | 0.99997 |
2 | 세린(Ser) | y=20.6894x-2.1976 | 0.99997 |
3 | 아스파르트산(Asp) | y=19.6119x+0.7603 | 0.99992 |
4 | 알라닌(Ala) | y=23.0974x+4.0342 | 0.99963 |
5 | 트레오닌(Thr) | y=24.4949x+3.2034 | 0.99963 |
6 | 글루탐산(Glu) | y=24.7983x+3.3148 | 0.99963 |
7 | 시스틴(Cys) | y=40.0386x+6.0799 | 0.99968 |
8 | 라이신(Lys) | y=45.3407x+9.2496 | 0.99967 |
9 | 히스티딘(그의) | y=34.6789x+11.3921 | 0.99942 |
10 | 아르기닌(Arg) | y=55.8643x+6.4591 | 0.99996 |
11 | 프롤린(프로) | y=70.7237x+20.7902 | 0.99945 |
12 | 발린(Val) | y=51.4909x+7.5024 | 0.99964 |
13 | 메티오닌(메트) | y=58.4620x-13.7992 | 0.99981 |
14 | 티로신(티르) | y=64.1751x+25.8099 | 0.99912 |
15 | 이소류신(Ile) | y=76.4371x+13.1955 | 0.99978 |
16 | 류신(Leu) | y=81.4997x+14.6637 | 0.99975 |
17 | 페닐알라닌(Phe) | y=89.0247x+22.3171 | 0.99951 |
4, 결론
이 연구에서는 HPLC-CAD 이 방법은 아미노산을 결정하는 데 사용됩니다. 는 시료 유도체화 과정 없이 직접 주입하여 분석할 수 있습니다. 유도체화로 인한 오류를 방지하기 위한 번거로운 전처리가 필요하지 않습니다. 유도체화 조건을 스크리닝할 필요가 없습니다(유도체화 시약, 반응 조건 등)을 사용하여 측정 오류를 줄입니다. 작업이 더 간단하고 결과가 정확하고 신뢰할 수 있으며 강력한 성능을 제공합니다. 기기 아미노산 측정을 위한 방법 지원.