以葡萄糖为例-英迈 CAD 性能考察
英迈仪器（天津）有限公司英迈仪器（天津）有限公司- 实验目的：葡萄糖-考察英迈CAD性能
- 实验条件：
仪器：英迈仪器CAD检测器（CADetector a1）
英迈仪器氮气发生器（Nitrogen Generator g15）
安捷伦液相色谱仪（HPLC-1200）
奥豪斯天平（AR1530，精度0.001g）
移液器（Finnpipette F1 20-200μL）
- 色谱柱：Alltech Chrom H+（氢型糖柱，300mm✖7.8mm，8μm）
- 试剂：屈臣氏蒸馏水
- 样品： D-Glucose （CHEM SERVICE，纯度99.5%）
- 流动相：纯水
1、实验过程
3.1 实验条件
流动相：纯水
色谱柱：氢型糖柱，300mm✖7.8mm，8μm
柱温：60℃
流速：1mL/min
样品浓度：葡萄糖5μg/mL
CAD条件
漂移管温度：40℃
雾化气流：3L/min
充电气流：1L/min
充电电流：1μA
Gain：0.05
RF：2.0
英迈仪器（天津）有限公司样品配置过程
称取0.100g葡萄糖置10mL容量瓶，用纯水溶解并稀释至刻度得10mg/mL样品，以10mg/mL为母液，逐步稀释得8mg/mL，7mg/mL，6mg/mL，5mg/mL，4mg/mL，3mg/mL，2mg/mL，1mg/mL样品；以1mg/mL为母液，逐步稀释得500μg/mL，400μg/mL，300μg/mL，200μg/mL，100μg/mL样品；以100μg/mL为母液，稀释得5.0μg/mL样品；以5.0μg/mL稀释得0.5μg/mL样品，以0.5μg/mL为母液，稀释得0.1μg/mL样品。
3.2 实验结果
3.2.1 基线噪音和基线漂移
Noise /噪音 (ASTM) | Drift/漂移 | |
测试结果 | 9.997fA | 25.27fA |
英迈仪器（天津）有限公司3.2.2 最小检测浓度
试样：5.0μg/mL葡萄糖，进样10μL
参考下列计算公式计算最小检测浓度：
最小检测浓度 (g/mL) | |
测试结果 | 4.48×10-8 |
英迈仪器（天津）有限公司3.2.3 线性范围
试样：100μg/mL，200μg/mL，300μg/mL，400μg/mL，500μg/mL；
1mg/mL，2mg/mL，3mg/mL，4mg/mL，5mg/mL，6mg/mL，7mg/mL，8mg/mL，10 mg/mL。
试验程序：
依次将100μg/mL，200μg/mL，300μg/mL，400μg/mL，500μg/mL样品注入液相色谱仪，以浓度和对应的响应做标准曲线。
在曲线上找出葡萄糖浓度大于500μg/mL各点的读数，与相应的各浓度点的测量值做比较，量值相差5%时的浓度作为检测上限CH，按照所得的最小检测浓度为检测下限CL值，CH/CL比值为线性范围。
浓度（g/mL） | 峰高（pA） |
1.00E-04 | 48.808 |
2.00E-04 | 109.756 |
3.00E-04 | 172.952 |
4.00E-04 | 243.223 |
5.00E-04 | 308.256 |
英迈仪器（天津）有限公司按照标准曲线计算测得样品浓度
峰高（pA） | 测得浓度（g/mL） | 理论浓度*0.95 | 理论浓度*1.05 | 理论浓度（g/mL） |
644.668 | 1.02E-03 | 9.50E-04 | 1.05E-03 | 1.00E-03 |
1281.296 | 1.99E-03 | 1.90E-03 | 2.10E-03 | 2.00E-03 |
1847.819 | 2.86E-03 | 2.85E-03 | 3.15E-03 | 3.00E-03 |
2437.555 | 3.77E-03 | 3.80E-03 | 4.20E-03 | 4.00E-03 |
2949.144 | 4.55E-03 | 4.75E-03 | 5.25E-03 | 5.00E-03 |
3496.665 | 5.39E-03 | 5.70E-03 | 6.30E-03 | 6.00E-03 |
4464.148 | 6.87E-03 | 7.60E-03 | 8.40E-03 | 8.00E-03 |
5322.588 | 8.19E-03 | 9.50E-03 | 1.05E-02 | 1.00E-02 |
由此可得CH为3.00×10-3 g/mL，CL为4.48×10-8 g/mL，线性范围=CH/CL
线性范围 | |
测试结果 | 6.69×104 |
3.2.4 整机性能（定性、定量重复性）
试样：5μg/mL，100μg/mL葡萄糖样品，5μg/mL进样10μL及20μL；100μg/mL进样5μL
试验程序：基线稳定后，向系统注入一定体积得葡萄糖标准溶液，连续测量6次，记录色谱图得保留时间和峰面积，计算相对标准偏差RSD6。
测试结果：
英迈仪器（天津）有限公司体积 | 5 µL | 10 µL | 20 µL | |||
保留时间 | 峰面积 | 保留时间 | 峰面积 | 保留时间 | 峰面积 | |
RSD% | 0.109% | 0.981% | 0.171% | 1.441% | 0.106% | 1.371% |
英迈仪器（天津）有限公司2、总结及讨论
结果总结
项目 | 结果 | 建议参考要求 |
基线噪音 | 9.997fA | ≤40fA |
基线漂移 | 25.27fA | ≤40fA/20min |
最小检测浓度 | 4.48×10-8 | ≤5×10-6g/mL葡萄糖水溶液 |
线性范围 | 6.69×104 | 优于103 |
定性重复性 | 0.109%（100μg/mL） | ≤1.5% |
定量重复性 | 0.981%（100μg/mL） | ≤4.0% |
结果讨论：由噪音漂移、最小检测浓度、线性范围、重复性等结果可知，英迈CAD检测器灵敏度高、线性范围宽、重复性好，是检测非挥发性物质的良好工具。
3、参考文献
GB/T 26792-2019 液相色谱仪
JJG 705-2014 高效液相色谱仪